タンパク質およびペプチドサンプルの前処理の自動化
宿主細胞タンパク質分析のためのサンプル前処理は、時間がかかり煩雑な作業となる場合があります。Agilent AssayMAP Bravo Platform は、タンパク質およびペプチドの強力なサンプル前処理ソリューションです。自動化により、サンプル前処理のばらつきが減少し、ワークフローの再現性が向上するため、作業時間をより有効に活用できます。
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宿主細胞タンパク質（HCP）分析は、治療用タンパク質の製造に使用される宿主細胞から、細胞培地中に共産生される低濃度タンパク質を検出して定量するために不可欠です。これらの汚染物質は、製品の安全性と効能を確保して、規制要件に適合するために最小限に抑える必要があります。低濃度汚染物質の検出および分析は困難な場合があり、信頼性と再現性の高い結果を得るためには、高い感度と特異性を備えた高度な技術が必要になります。アジレントでは、自動化、LC、LC/MS、ソフトウェアなど、HCP 分析のためのサンプルから結果までのソリューションの包括的なポートフォリオをご用意しています。
HCP は、MS1 プロファイリング、反復指向性 MS、および 2D-LC/MS フラクショネーション手法により確実に同定できます。
宿主細胞タンパク質分析のためのサンプル前処理は、時間がかかり煩雑な作業となる場合があります。Agilent AssayMAP Bravo Platform は、タンパク質およびペプチドの強力なサンプル前処理ソリューションです。自動化により、サンプル前処理のばらつきが減少し、ワークフローの再現性が向上するため、作業時間をより有効に活用できます。
アジレントは、分析に適したカラム、標準、試薬、消耗品を簡単にお選びいただけるオーダーガイドとセレクションツールをご用意しております。アジレントは、お客様が必要とする分離能と性能を得られるようお手伝いします。
モノクローナル抗体治療薬に含まれる ppm 未満の宿主細胞タンパク質を定量するメソッドをご覧ください。このワークフローでは、Agilent AssayMAP Bravo Automated Protein Sample Preparation Platform、1290 Infinity III LC システム、および Agilent 6495 トリプル四重極 LC/MS を使用しました。
低濃度の宿主細胞タンパク質を LC/MS により検出するには、治療薬を大量に注入する必要があり、場合によっては 100 µg を超える量が必要になることがあります。ここでは、ロード量と宿主細胞タンパク質の検出レベル間のバランスを調査します。予想どおり、サンプルの注入量が最大の場合には、検出されるタンパク質の数が最も多く、最高の感度が得られました。少量の注入の場合でも、1 ppm 未満の濃度のタンパク質を検出することができました。あるいは、反復 MS/MS 分析により、サンプルを 2 回に分けて注入することもできます。Agilent AdvanceBio ペプチドプラスカラム、Agilent AdvanceBio 6545XT LC/Q-TOF、および Protein Metrics Byos を用いた高感度のワークフローは、AAV HCP 分析のようなサンプルが限定されるアプリケーションにおいて、高感度を実現します。
タンパク質およびペプチドサンプルの自動前処理プラットフォームである AssayMAP Bravo は、宿主細胞タンパク質サンプル前処理において、高い再現性、拡張性、柔軟性、および使いやすさを実現しました。6545XT AdvanceBio LC/Q-TOF を用いた反復 MS/MS は、タンパク質同定の対象範囲を拡張します。LC-MS/MS と反復 MS/MS 取り込みを組み合わせることにより、添加した標準タンパク質をすべて 8 ppm 超で高い信頼性により同定しました。AssayMAP Bravo を用いて HPRP フラクショネーションを追加することにより、添加したタンパク質をすべて 2 ppm 超で同定しました。
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