Protein Expression Competent Cell Pack

Protein Expression Competent Cell Pack

  • タンパク質発現用のコンピテントセル4種のパック
  • 全長のタンパク質発現に
  • 哺乳類タンパク質の大腸菌での発現に
  • 毒性のあるタンパク質の発現に
  • タンパク質発現用の株への直接のクローニングに
 
資料検索
マニュアル検索
分析保証書
MSDS
学術お問い合わせ
よくある質問
ベクターマップ &
シーケンス

大腸菌でのタンパク質発現に、経済的なソリューション

大腸菌でのタンパク質発現を最適化する場合には、アジレント(旧ストラタジーン)のProtein Expression Competent Cell Packがお勧めです。BL21株由来の独自のタンパク質発現用大腸菌株が4種類セットになっていますので、さまざまな問題を克服し、より高レベルでのタンパク質発現が経済的に実現できます。

コドンバイアスを克服し、全長の哺乳類タンパク質を大腸菌で発現

アジレント(旧ストラタジーン)のBL21-CodonPlus-RIPL Competent Cellsは大腸菌では使用頻度の低い4種類のコドン(R, I, P, L)すべてを補うプラスミドが組み込まれており、ATリッチなゲノム、GCリッチなゲノムの双方に対応可能で幅広く真核生物の遺伝子を発現することができます。

厳密な発現のコントロールで毒性タンパク質の発現

誘導をかけない状態でもT7 RNAポリメラーゼの基底レベルの活性があるため、タンパク質は少量発現しますが、ホストの大腸菌に対して毒性を発揮するタンパク質がコードされている場合にこの基底レベルの発現が問題となります。アジレント(旧ストラタジーン)のBL21-Gold(DE3)pLysS株では、T7 lysozymeを低レベルで発現されることでT7 RNAポリメラーゼの活性を阻害して基底レベルでのタンパク質発現を抑制します。IPTGで誘導をかけた際には、T7 RNAポリメラーゼの発現がT7 lysozymeに比べて圧倒的に多くなるため抑制は解除され、目的タンパク質が発現します。

クローニングからタンパク質発現までできるBL21-Gold コンピテントセル

BL21-Gold 細胞はクローニングおよびタンパク質発現の両方に理想的な大腸菌株です。BL21-Gold株は EndA1 ヌクレアーゼを欠損しているので、高品質なプラスミドDNAを精製することができます。また、BL21-Goldは Hte 表現型を持ち、親株のBL21菌株と比べて100倍以上もの形質転換効率があります。BL21-Goldに直接クローニングすることにより、他の菌株でクローニングしたのちに発現用の菌株にサブクローニングという従来の方法に比べて二日間も時間を節約することができます。endA (-) 遺伝子型と高い形質転換効率で、BL21-Gold 株は遺伝子のクローニング・発現コンストラクト構築、組み換えタンパク質発現のプロセスを大幅に加速します。

最適化されたタンパク質発現システム

アジレント(旧ストラタジーン)のすべてのBL21由来株は、OmpTプロテアーゼ、Lonプロテアーゼを欠いているので、組換えタンパク質が分解されることなくintactで精製することができます。また、BL21由来株は、ほとんどの大腸菌用発現ベクターを使用することができます。BL21(DE3)株は、Variflex protein expression systems などのT7プロモーターを搭載した発現ベクターでのタンパク質の発現にしようできます。

遺伝子型

  • BL21-Gold(DE3)pLysS strain: E. coli B F- dcm+ Hte ompT hsdS(rB- mB-) gal l (DE3) [pLysS Camr] endA Tetr
  • BL21-Gold (DE3) strain: E. coli B F- dcm+ Hte ompT hsdS(rB- mB-) gal l (DE3) endA Tetr
  • BL21(DE3) strain: E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal l (DE3)
  • BL21-CodonPlus-RIPL strain: E. coli B F– ompT hsdS(rB– mB–) dcm+ Tetr gal l (DE3) endA Hte [argU proL Camr] [argU ileY leuW Strep/Specr]*

これらすべての株は、Lonプロテアーゼ、OmpTプロテアーゼをもともと欠損し一般的にタンパク質発現に用いられるE. coli Bに由来します。Dcm methylaseはE. coli B株では欠損していますが、上記菌株ではゲノムに挿入されています。*Streptomycinに対しては75 mg/ml以上の濃度では感受性があります。

資料検索

>>  Licensing

U.S. Patent No. 6,706,525 and patents pending

Codon usage:
Purchase of this product is accompanied by a limited use license to use the product as a reagent for research purposes. If Purchaser intends to use the product outside the scope of the license, he needs to enter into a License Agreement with F. Hoffmann-La Roche Ltd, Grenzacherstrasse 124, 4070 Basel, Switzerland or Hoffmann-La Roche Inc.

The T7 expression system is based on technology developed at Brookhaven National Laboratory under contract with the U.S. Department of Energy and is protected by U.S. patents assigned to Brookhaven Science Associates (BSA). BSA will grant a nonexclusive license for use of this technology, including the enclosed materials, based on the following assurances:

1. These materials are to be used for noncommercial research purposes only. A separate license is required for any commercial use, including the use of these materials for research purposes or production purposes by any commercial entity. Information about commercial licenses may be obtained from the Office of Intellectual Property and Industrial Partnerships, Brookhaven National Laboratory, Bldg. 475D, Upton, New York, 11973 [telephone (631) 344-7134].

2. No materials that contain the cloned copy of T7 gene 1, the gene for T7 RNA polymerase, may be distributed further to third parties outside of your laboratory, unless the recipient receives a copy of this license and agrees to be bound by its terms. This limitation applies to strains ArcticExpressand ArcticExpress (DE3), included in this kit and any derivatives you may make of them. You may refuse this license by returning the enclosed materials unused. By keeping or using the enclosed materials, you agree to be bound by the terms of this license

The purchase price of this product includes limited, nontransferable license under patents owned by Hoffmann-La Roche Inc. and F. Hoffmann-La Roche Ltd ("Roche"), to use this product only as are agent for research purposes. No other license under these patents to use this product is conveyed expressly or by implication to the purchaser by the purchase of this product. A further license is available from Roche for commercial purposes. Further information on purchasing licenses may be obtained by contacting the Head of Licensing, F. Hoffmann-La Roche Ltd, Grenzacherstrasse 124, 4070 Basel, Switzerland.

The DNA sequences encoding for cold-adapted chaperone proteins or variants thereof, are proprietary or exclusively licensed to Agilent and licensed hereunder for research purposes only. Licensee may modify only the non-coding region outside of the nucleic acid encoding the cold-adapted chaperone proteins of the Products to facilitate non-commercial research. Licensee shall not have any rights to (i) modify the coding region of the nucleic acid encoding the cold-adapted chaperone proteins of the Products, (ii) offer the Products, or any component, derivative or modification thereof, for resale, or (iii) distribute, transfer, or otherwise provide access to, the Products, or any component, derivative or modification thereof, to any third party for any purpose or use.
U.S. Patent No. 6,706,525 and patents pending
T7 Promoter: U.S. Patent No. 4,952,496. For academic or non-profit laboratories, an assurance letter accompanies the sale of the products. For commercial laboratories, a research use license agreement must be entered into prior to purchase of the products.

 
Product Catalog # Amount Price

Protein Expression Competent Cells Pack

230246 1 kit お問い合わせください Call
Optimize your protein expression experiments for full length and high level expression by cloning into our variety pack of BL21 Competent Cells.
200 µl of each: BL21 (DE3) Competent Cells, BL21 Gold (DE3) Competent Cells, BL21 Codon Plus (DE3)-RIPL Competent Cells and BL21 Gold (DE3) pLysS Competent Cells.
マニュアル マニュアル

BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL Competent Cells

230280 10 x 0.1 ml お問い合わせください Call
These cells contain extra copies of rare E. coli argU, ileY, leuW, proL tRNA genes which corrects for codon bias and dramatically improves expression of sequences from other organisms.
BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL competent cells, pUC18 control DNA, XL10-GoldÒ BME
分析保証書(C of A) 分析保証書 (C of A)   マニュアル マニュアル

BL21(DE3) Competent Cells

200131 5 x 0.2 ml お問い合わせください Call
For non-toxic proteins, encodes T7 RNA polymerase under the control of the lacUV5 promoter. Use with Variflex or Affinity pCAL vectors.
分析保証書(C of A) 分析保証書 (C of A)   マニュアル マニュアル

BL21-Gold (DE3) Competent Cells

230132 10 x 0.1 ml お問い合わせください Call
For non-toxic proteins, encodes T7 RNA polymerase under the control of the lacUV5 promoter. Use with Variflex or Affinity pCAL vectors. Efficiency is >=1 x 108 cfu/µg of supercoiled DNA
分析保証書(C of A) 分析保証書 (C of A)   マニュアル マニュアル

BL21-Gold (DE3)pLysS Competent Cells

230134 10 x 0.1 ml お問い合わせください Call
For both toxic and non-toxic proteins, pLysS codes for T7 lysozome, a T7 RNA polymerase inhibitor. Use with Variflex or Affinity pCAL vectors. Efficiency is >=1 x 108 cfu/ µg of supercoiled DNA
分析保証書(C of A) 分析保証書 (C of A)   マニュアル マニュアル