Brilliant II SYBR® Green QPCR and QRT-PCR Reagents

  • 高感度でより小さいCt値を実現
  • 再現性がさらに向上
  • 高い蛍光度(従来の従来のBrilliantの2倍!)
  • 高速サイクリング可能
  • さまざまなテンプレートに対応可能
  • より正確な定量実験結果を実現
  • アジレント(旧ストラタジーン)の Mx QPCR Systemsでの使用に最適
 
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Brilliant II SYBR® Green QPCR 、QRT-PCR試薬はこれまでにない高い感度と再現性を実現しました。

Brilliant II SYBR® Green QPCRマスター・ミックス - より強い蛍光度、高速サイクリング、より高い感度

  • 高速ランの実現:推奨プロトコルで25%、高速プロトコルで40%もBrilliant 使用の場合よりラン時間を短縮!
  • 低コピーでの感度を向上させるためにG, A, T, CのdNTPを採用

Brilliant II SYBR® Green QPCR Master Mixは、従来のBrilliant SYBR® Green QPCR Master Mixと比較して2倍以上の高い傾向度があり、Ctの立ち上がりが非常に早くなっています(図1)。本製品は、反応時間を短縮したサイクル条件化で至適化されているため、推奨プロトコルでも25%の時間短縮が可能で、競合他社製品よりも短時間でプログラムを終了することができます。さらに、150 bp以下の長さのターゲットの場合はより高速のサイクリングにも対応が可能で、この高速プロトコルでは40%の時間短縮が可能です。

図1 幅広い濃度帯における感度と再現性の比較

100 ngから0.01 ngまでの10倍希釈列のcDNAからGAPDHをターゲットとして増幅(150bp)した。Brilliant II試薬では他社製品よ りも1-3 Ct早くシグナルが立ち上がり、増幅効率、スタンダードカーブのR2値ともに非常に良好であった。

Brilliant II SYBR® Green QRT-PCR 1-Step Master Mix試薬

Brilliant II SYBR® Green QRT-PCR 1-Stepはこれまでにない高い感度と再現性を実現しました。他社競合品と比較すると、高濃度や低濃度のテンプレートにおいてCtの立ち 上がりが早いだけではなく、あらゆる範囲のテンプレート濃度において反応効率が優れています(図2)。

早いCtでターゲットを検出することにより、従来よりも少ないサイクル数でも検出に十分な増幅が得られ、増幅産物のサイクル毎の複製誤差を減らすことができます。これにより、再現性が改善され、より正確な定量結果を得ることができます。また、高い感度を実現したことにより、テンプレート濃度のわずかな差を検出する際の再現性にも優れています(図3)。

さらに、Brilliant II SYBR® Green QRT-PCR 1-Step試薬にはMMLV逆転写酵素を由来として、Brilliant IIでの1-Step QRT-PCRに最適化された逆転写酵素が配合されています。50℃での逆転写反応で最大の能力を発揮します。

図2 幅広い濃度帯における感度と再現性の比較

0.2 pgから200 ngのトータルRNAを用いてADP Ribosyl Factor II (ARF)遺伝子を増幅したところ、Brilliant II試薬は他社製品よ りも2-5 Ct早く立ち上がった。R2 = 0.988、増幅効率 = 100.2%

図3 製品間での再現性の比較

20 pgのトータルRNAからARF遺伝子を8つのレプリケートで増幅したところ、Brilliant II SYBR® QRT-PCR 1-step Master Mix試薬では最大と最少のCtの違いが0.85であっ たのに対して、他社製品では1.2~3.2であった。

Brilliant II SYBR® Green QRT-PCR 2-Step Master Mix Reagents

The Brilliant II SYBR® QRT-PCR 2-Step試薬には、幅広い反応温度帯で高い活性を持つ AffinityScript Multiple Temperature Reverse Transcriptase (RT)が使われています。本酵素では、MMLV由来の逆転写酵素に複数 の変異を導入することで、37~55℃のあいだで高い活性を長時間維持することができ、高温での逆転写反応でも十分な量のcDNA合成が 可能になっています。このため本製品では、二次構造等を持つ難しいテンプレートからでも、これまでにない高い再現性と感度を兼ね 備えた、2-Stepでの逆転写定量PCR(QRT-PCR)を行うことができます。

Brilliant II 試薬とMx QPCR システムの組み合わせで最大のパフォーマンスを!

The Brilliant QPCR、QRT-PCR シリーズは、アジレント(旧ストラタジーン)のリアルタイム定量PCRシステム、Mx3000P と Mx3005Pを使って開発されました。Brilliant II試薬をMx 組みあわせてお使いいただくことで最大のパフォーマン スが得られます。

Mx3005P QPCR System
5色マルチプレッ クス機能、FRET機能を搭載したハイスペックかつフレキシビリティーに優れた、新世代リアルタイム定量PCRシステム

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Brilliant II SYBR® Green QPCR Master Mix

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Brilliant II SYBR® Green QPCR Master Mix, 10 Packs

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Brilliant II SYBR® Green QRT-PCR Master Mix, 1-Step, 400rxn

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Brilliant II SYBR® Green QRT-PCR Master Mix, 1-Step, 4,000rxn

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Brilliant II SYBR® Green QRT-PCR AffinityScript Master Mix, 2-step

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