Agilent Seahorse XF Flex を用いた Agilent Seahorse XF Mito Tox アッセイの適用

Pub.No. 5994-9075JAJP

肝臓オルガノイドにおけるミトコンドリア毒性の定量的評価

肝臓オルガノイドは、肝臓代謝機能、組織構造、および細胞不均一性を従来の 2 次元肝細胞培養や一部の動物モデルよりも正確に再現する、生理学的に適切な in vitro モデルです。このアプリケーションノートでは、Agilent Seahorse XF Flex オルガノイドマイクロプレートで培養したマウス肝臓オルガノイドシステムを使用して Agilent Seahorse XF Mito Tox アッセイを実行するワークフローについて取り上げます。Seahorse XF Mito Tox アッセイと Seahorse XF Flex オルガノイドマイクロプレートを組み合わせて使用することで、マトリックス足場内で成長したオルガノイドにおける薬物誘発性ミトコンドリア機能障害を Mito Tox Index（MTI）によって定量できます。MTI には、薬物化合物のミトコンドリア阻害や脱共役の程度が反映されます。4 種類の参照ミトコンドリア毒性物質（3 種類の阻害剤と 1 種類の脱共役剤）を Cmax の 10 倍濃度で評価しました。その結果、ミトコンドリア毒性を定量的に評価できる堅牢性と再現性に優れたプラットフォームであることが実証され、このワークフローの実行可能性が確認されました。また、医薬品の安全性の予測に対する、オルガノイドを使用したミトコンドリア毒性アッセイの可能性が明確になりました。

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