Agilent Cary 3500 UV-Vis により高速昇温速度で 再現性に優れた融解温度（Tm）データを実現

Pub.No. 5994-0384JAJP

UV-Vis 分光光度計を用いた二本鎖核酸の熱融解温度の高速測定

二本鎖核酸は、温度を上昇させると分離して一本鎖になります。この現象は、特定の温度で塩基ペア間の水素（H）結合が切断されることにより生じます。熱融解実験では、核酸塩基間の H 結合数の違いを利用します。例えば、DNA ではヌクレオチドのアデノシンとチミン（A=T）およびグアニンとシトシン（GΞC）、RNA ではアデノシンとウラシル（A=U）および G と C の各塩基間に H 結合が形成されます。ヌクレオチド間の塩基結合 GΞC には 3 つの水素結合が関与するため、その切断には二重結合のペアよりも大きな熱エネルギーが必要となります。また、DNA および RNA に含まれる GΞC ペアが多いほど、融解温度は高くなります。このように、融解温度（Tm）は、サンプル中の塩基組成（GΞC に対する A=T または U=T の比率）を正確に表す指標になります。 (2022年12月改定）

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