バイオアナライザを用いたマルチプレックス PCR の条件検討

Pub.No. 5988-9342EN

Highly efficient multiplex PCR using novel reaction chemistry (バイオアナライザを用いたマルチプレックス PCR の条件検討)

バイオアナライザ DNA キットと QIAGEN Multiplex PCR Master Mix を用いてマルチプレックス PCR の条件検討を行った。マルチプレックス PCR では複数のプライマーを用いるため、通常の PCR (0.2 - 0.5uM) に比べてプライマー濃度が高濃度 (2-4nM) になり、その結果プライマーダイマーや非特異的な増幅が起こる場合がある。ホットスタート法によりプライマーダイマーを減少させることができた。また、反応バッファー中の Mg++ 濃度の最適化により、増幅効率を上昇させることができた。

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