ヘラクレス(Herculase) Enhanced DNA Polymerase

ヘラクレス(Herculase) Enhanced DNAポリメラーゼ

  • 増幅の難しいテンプレート、GC-リッチのテンプレートを効果的に増幅
  • ArchaeMaxx  enhancing factor を含む
  • Taq DNA polymeraseや Taq ベースのブレンドよりも高いフィデリティ
  • ゲノムDNAで37kb、ラムダDNAで50kbまで増幅可能
  • 特異性を高めるホット・スタート仕様も販売

PCR カタログ (英語、5991-9020EN)

 
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ヘラクレス(Herculase) Enhanced DNA Polymerase、ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA polymerase*,‡は、難易度の高いPCRに優れた性能を発揮する酵素です。長いテンプレートを正確に増幅したり、増幅の難しいGC-リッチのテンプレートを増幅するなど、どちらの場合でも、ヘラクレス(Herculase) Enhanced  DNA Polymeraseと ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA polymeraseが実験を成功に導きます。ヘラクレス(Herculase) DNA polymeraseは ハイ フィデリティ Pfu DNA Polymerase、Taq DNA polymerase、そしてアジレント(旧ストラタジーン)独自のArchaeMaxx polymerase-enhancing factor** を含み、最適化された配合になっています。中でも ArchaeMaxx polymerase-enhancing factorの効果で豊富な収量が得られます。また、Taq DNA polymeraseや他の Taq ベースのブレンド酵素よりも優れたフィデリティを持つと共に、様々な長さのテンプレートを増幅することが可能です1。添付のDMSOは、GCリッチなどの増幅困難な配列を増幅する際や、非常に長い配列を増幅する際にお使いください。

ヘラクレス(Herculase) Enhanced DNA Polymerase、ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA polymeraseとも 100 bp から 37 kb の長さの複雑なゲノム配列や約50 kb までのラムダDNA配列など、幅広いサイズ、複雑性のテンプレートを力強く増幅します。エラー率測定結果から、ヘラクレス(Herculase) DNA polymeraseは Taq DNAポリメラーゼや他の市販されている Taq ベースの製品よりも正確性が高いことが示されました。

アジレント(旧ストラタジーン)独自のArchaeMaxx Factor

ArchaeMaxx因子はアジレント(旧ストラタジーン)の研究者により Pyrococcus furiosus から発見されたもので、好熱菌性ポリメラーゼに対するPCR阻害物質を取り除く働きがあることがわかっています。通常、PCRの反応が進むにつれ、dCTPが脱アミノ化されて生じるdUTPが蓄積していきます。DNA鎖にdUTPが取り込まれると、Pfuをはじめとする校正機能をもつ古細菌性のDNAポリメラーゼの活性が阻害され、増幅効率が低下します。ArchaeMaxx 因子は、dUTPをdUMPに脱リン酸化することで、伸張するDNA鎖にdUTPが組み込まれるのを防ぎます。その結果、増幅性が改善し、長いテンプレートの増幅を可能にします。また、伸張時間も大きく短縮され、PCR反応を全般的に改善させる効果があります。ArchaeMaxx 因子は、アジレント(旧ストラタジーン)のPCR酵素にだけ添加されています。

高い増幅効率

増幅効率は一回のPCRサイクルあたりの fold amplification の測定値であり、完璧な倍加と比較した時の割合あるいはパーセンテージとして表現されます(完璧な倍加のPCRは 100% の増幅効率を示します)。PCR効率を一度測定すれば、特定の鋳型の量から fold amplification を測定したり、あるいは、希望する収量を得るために必要なPCRサイクル数の計算をすることに利用できます。増幅効率の小さな変化はPCRのサイクル中に増幅され、最終産物の収量の変化は著しいものとなります。例えば、25-サイクルのPCRでは、5% の増幅率向上が二倍の最終産物収量の増加となります。†効率の低い反応は収量が少なくなるだけではなく、効率の高い反応よりも飽和状態になるまでに長い時間がかかります。このため、プライマー・ダイマーや望ましくない副産物が増幅される機会が増えてしまいます。リアルタイムQPCR方法を使用した解析では、ヘラクレス(Herculase) enhanced DNA polymeraseは他のプルーフリーディング・ポリメラーゼよりも高い増幅効率を示すことが明らかになりました4

ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA Polymerase

ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA polymeraseはヘラクレス(Herculase) Enhanced DNA Polymeraseの高いパフォーマンスを維持したまま、特異性が向上しており、しばしば見られるプライマー・ダイマーや非特異的バンドを極力抑える仕様となっており、難しいPCRでの収量を向上させることができます。ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA polymerasは低コピー数のターゲットを複雑なサンプルから検出する際に理想的です。ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA polymerasはサイクル条件の変更無しにPCRプロトコールへ取り入れることが可能な、抗体‐不活性化型のDNAポリメラーゼです。このホットスタート仕様では、DNAポリメラーゼ活性と 3' -5'エキソヌクレアーゼ活性の両方ともにサイクルが開始するまで完全に不活性化されています。

†増幅効率は実験的な fold amplification を測定する時に以下の公式を用いて求められます。 N/N0=(1+E)n N0 = 最初の分子数、N = 増幅された分子数、 E = 効率 そして n = PCRサイクル数

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Herculase enhanced DNA polymerase easily amplifies an 82.5% GC-rich fragment of Fragile X gene from human genomic DNA.

>>  Footnotes

  • 1. Borns, M. and Hogrefe, H. (2000), Strategies. 13: 12.
  • 2. Hogrefe, H., et al. (2002), Proc Natl Acad Sci USA 99: 596-601
  • 3. Lasken et al. (1996), JBC 271: 17692-17696
  • 4. Arezi, B., et al.  (2003), Anal. Biochem. 321:226-235

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ヘラクレス(Herculase) Enhanced DNA Polymerase, 100 U

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Challenging cloning applications, Long and/or GC -rich targets, Amplifies a wide range of complex targets up to 50 kb, Higher fidelity than Taq DNA polymerase and Taq-based blends
ヘラクレス(Herculase) DNA polymerase, 10X ヘラクレス(Herculase) buffer, DMSO
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Challenging cloning applications, Long and/or GC -rich targets, Amplifies a wide range of complex targets up to 50 kb, Higher fidelity than Taq DNA polymerase and Taq-based blends
ヘラクレス(Herculase) DNA polymerase, 10X ヘラクレス(Herculase) buffer, DMSO
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ヘラクレス(Herculase) Enhanced DNA Polymerase, 1000 U

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Challenging cloning applications, Long and/or GC -rich targets, Amplifies a wide range of complex targets up to 50 kb, Higher fidelity than Taq DNA polymerase and Taq-based blends
ヘラクレス(Herculase) DNA polymerase, 10X ヘラクレス(Herculase) buffer, DMSO
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ヘラクレス(Herculase) Enhanced DNA Polymerase, 5000 U

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Challenging cloning applications, Long and/or GC -rich targets, Amplifies a wide range of complex targets up to 50 kb, Higher fidelity than Taq DNA polymerase and Taq-based blends
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ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA Polymerase, 100 U

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ハイフィデリティ、高いプライマー特性の発揮、ロングPCRやGCリッチな領域の増幅に最適
ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA ポリメラーゼ、 10X ヘラクレス(Herculase)反応バッファー、 DMSO
100ユニット
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ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA Polymerase, 500 U

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ハイフィデリティ、高いプライマー特性の発揮、ロングPCRやGCリッチな領域の増幅に最適
ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA ポリメラーゼ、 10X ヘラクレス(Herculase)反応バッファー、 DMSO
500ユニット
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ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA Polymerase, 1000 U

600314 1,000 U お問い合わせください Call
ハイフィデリティ、高いプライマー特性の発揮、ロングPCRやGCリッチな領域の増幅に最適
ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA ポリメラーゼ、 10X ヘラクレス(Herculase)反応バッファー、 DMSO
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