ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA Polymerase

ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNAポリメラーゼとPCRマスターミックス

  • 長いテンプレート、複雑なテンプレート、GC-リッチなテンプレートを効率よく増幅
  • ArchaeMaxx 促進ファクターによる秀でたパフォーマンス
  • Taq ベースのブレンド酵素を上回る正確さ
  • ホットスタート フォーミュレーションで特異性が向上
  • 新!便利で使いやすいマスターミックス仕様

PCR カタログ (英語、5991-9020EN)

 
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困難なPCR条件を克服

ヘラクレス(Herculase) hotstart DNAポリメラーゼ*,‡は、今日ならではの複雑なPCR用途の希望にも応えることのできる高性能の酵素です。長いテンプレートを正確に増幅したり、増幅の難しいGC-リッチのテンプレートを増幅するなど、どちらの場合でも、ヘラクレス(Herculase) Enhanced  DNA Polymeraseとヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA polymeraseが実験を成功に導きます。ヘラクレス(Herculase) DNA polymeraseは ハイ フィデリティ Pfu DNA Polymerase、Taq DNA polymerase、そしてアジレント(旧ストラタジーン)独自のArchaeMaxx polymerase-enhancing factor** を含み、最適化された配合になっています。中でも ArchaeMaxx polymerase-enhancing factorの効果で豊富な収量が得られます。また、Taq DNA polymeraseや他の Taq ベースのブレンド酵素よりも優れたフィデリティを持つと共に、様々な長さのテンプレートを増幅することが可能で、100 bp から 37 kb の長さの複雑なゲノム配列や約50 kb までのラムダDNA配列が増幅可能です1。添付のDMSOは、GCリッチなどの増幅困難な配列を増幅する際や、非常に長い配列を増幅する際にお使いください。

アジレント(旧ストラタジーン)が誇るArchaeMaxx ファクター

ArchaeMaxx ポリメラーゼ‐促進ファクターはヘラクレス(Herculase) hotstart DNAポリメラーゼにおいて重要な成分のひとつです。ArchaeMaxx ファクターはPCR反応中のdCTP脱アミノ化2による dUTP 蓄積によって引き起こされる "dUTP ポイズニング" を克服することによって、Pfu DNAポリメラーゼによる増幅産物の収量を向上させます。このdUTP ポイズニングは Pfu や、VentR および Deep VentR DNAポリメラーゼのような古細菌のプルーフリーディング ポリメラーゼの働きを抑制し、これらの酵素の効率を制限しています3。ArchaeMaxx ファクターはdUTPaseとして機能し有毒なdUTPをdUMPと無機ピロリン酸へ転換させ無害化します。その結果、短縮された伸長時間、高い収量そしてより優れた伸長能力など総合的なPCRパフォーマンスを向上させています。

より高い増幅効率

増幅効率は一回のPCRサイクルあたりの増幅倍率の比率であり、完璧な倍加と比較した時の割合やパーセンテージとして表現されます(完璧な倍加のPCRは100%の増幅効率を示します)。ひとたびPCRシステムの効率が測定されれば、特定のターゲットの量から最終増幅倍率を計算、あるいは、希望する収量を得るために必要なPCRサイクル数の計算をすることに利用できます。増幅効率の小さな変化はマルチ‐サイクルPCR中に誇張され、著しい産物収量の変化を導きます。例えば、25-サイクルPCRでは、5%の増幅率向上が二倍の産物収量の増加へつながります。†低効率反応は少ない収量をもたらすだけでなく、高効率反応よりも飽和状態になるまでに長い時間を必要とします。これによって、プライマーダイマーや望ましくない副産物が増幅されやすくなります。リアルタイムQPCR方法を使用した解析では、ヘラクレス(Herculase) enhanced DNAポリメラーゼは他のプルーフリーディング ポリメラーゼよりも高い増幅効率を示すことが明らかになりました4

ホットスタートフォーミュレーションによる特異性の向上

ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNAポリメラーゼは多くの困難を伴うPCRシステムにおいて特異性を向上させ、バックグラウンドを減らし、そして収量を高めます。この独自のホットスタート仕様はサイクルが開始するまでDNAポリメラーゼと3' -5' エキソヌクレアーゼ活性の両方を効果的に不活化するモノクローナル抗体を採用しています。ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNAポリメラーゼは複雑なゲノムDNAから低コピー数の標的を増幅する時やPCR反応のセットアップを室温で行いたい時などにご利用ください。

ヘラクレス(Herculase) Hotstart PCRマスターミックス

ヘラクレス(Herculase) hotstart PCR マスターミックス*はヘラクレス(Herculase) hotstart DNAポリメラーゼ、最適化されたバッファー、MgCl2、dNTPがすべて含まれた便利な2X仕様です。ヘラクレス(Herculase) PCR マスターミックスを使用することにより、貴重な時間を節約し、スループットを向上させる一方で、ピペッティングのステップを減らし、クロス‐コンタミネーションを最小限に抑えます。サンプル間での再現性高く安定した結果が期待できるとともに、ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA Polymeraseの性能が最大限に発揮されます。

†増幅効率は実験的な増幅倍率を測定する時に以下の公式を用いて求められます。

N/N0=(1+E)n

N0 = 最初の分子数、N = 増幅された分子数、 E = 効率 そして n = PCRサイクル数

>>  Footnotes

  • 1. Borns, M. and Hogrefe, H., (2000), Strategies 13:12
  • 2. Hogrefe, H., et al. (2002), Proc Natl Acad Sci USA 99: 596-601
  • 3. Fogg, et al. (2002), Nat Struct Biol. 9(12): 922-927
  • 4. Arezi, B., et al.  (2003), Anal. Biochem. 321:226-235

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U.S. Patent Nos. 6,734,293; 6,489,150; 6,444,428; 6,183,997; 5,948,663; 5,866,395; 5,556,772; 5,545,552; Patents pending
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ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA Polymerase, 100 U

600310 100 U お問い合わせください Call
ハイフィデリティ、高いプライマー特性の発揮、ロングPCRやGCリッチな領域の増幅に最適
ヘラクレス(Herculase) Hotstart DNA ポリメラーゼ、 10X ヘラクレス(Herculase)反応バッファー、 DMSO
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ハイフィデリティ、高いプライマー特性の発揮、ロングPCRやGCリッチな領域の増幅に最適
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