Pfu DNA Polymerases [RUO]

Pfu DNAポリメラーゼ

  • ハイフィデリティ増幅に理想的
  • 3'-5' エキソヌクレアーゼ活性が低いエラー率を提供
  • 現在可能な最も熱安定性の高いDNAポリメラーゼ
  • 拡張酵素の欠如により、不要な 3' オーバーハングは無し
  • 平滑末端PCRクローニングに最適
  • 最適温度は 75 ℃ くらい
  • 98 ℃ で1時間インキュベーションしても 95% 以上の活性をキープ

PCR カタログ (英語、5991-9020EN)

掲載の製品はすべて試験研究用です。診断目的にご利用いただくことはできません。

ネイティブと組み換え体 Pfu DNAポリメラーゼ

用途

  • ハイフィデリティPCRとプライマー拡張反応
  • PCRクローニングと平滑末端増幅産物の産生

ハイフィデリティ熱安定性酵素

超好熱性の古細菌、Pyrococcus furiosus、に由来する Pfu DNAポリメラーゼは他の熱安定性ポリメラーゼと比べて、優れた熱安定性とプルーフリーディング性質を備えていることが示されてきました。1-6 Taq DNAポリメラーゼとは違い、非常に熱安定性である Pfu DNAポリメラーゼはポリメラーゼがヌクレオチド‐誤取り込みエラーを修正できる 3' から 5' へのエキソヌクレアーゼプルーフリーディング活性を持っています。これは、Pfu DNA ポリメラーゼによって産生されたPCRフラグメントは Taq によって産生されたPCRインサートよりも少ないエラーを持つことを意味しています。PCR反応で Pfu DNAポリメラーゼを使用することにより、PCR-Script ベクターのような平滑末端ベクターへのクローニングに理想的な平滑末端のPCR産物となります。Pfu DNA ポリメラーゼはハイフィデリティDNA合成を必要とする技術において優れています。

製品規格

  • 単位規格:1ユニットは 72 ℃ で 10 nm のトータルdNTP を30分で組み入れます
  • 濃度:2,500 ユニット/ml
  • 純度:PCR用途のために広範に検査されました

反応条件

  • 本来の Pfu ポリメラーゼ:1X ネイティブ Pfu バッファー§、200 µM のそれぞれの dNTP、0.1~0.5 µM のそれぞれのプライマー、2.5 ユニットのネイティブ酵素、1~100 ng プラスミド鋳型DNA、もしくは 100~250 ng ゲノム鋳型DNA
  • クローン Pfu ポリメラーゼ:1X クローン Pfu バッファー§、200 µM のそれぞれの dNTP、0.1~0.5 µM のそれぞれのプライマー、2.5 ユニットのクローン酵素、1~100 ng プラスミド鋳型DNA、もしくは 100~250 ng ゲノム鋳型DNA
  • 保存用バッファー:50 mM Tris-Cl (pH 8.2)、0.1 mM EDTA、1mM DTT、0.1% Igepal、0.1% Tween 20、50% グリセロール
  • 保証できる安定性:‐20℃で6ヶ月

§cDNAの増幅ではMg2+の終濃度を2 mM から 3 mMへ上げる必要があるかもしれません。

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Accuracy of Thermostable DNA Polymerases: PfuTurbo and Pfu DNA polymerases are the most accurate thermostable enzymes during DNA synthesis. Accuracy is defined as the average number of correct nucleotides a given polymerase incorporates before making an error. Enzyme accuracy is represented as error rate^-1 where error rate = mutation frequency per bp per duplication.

>>  Footnotes

  • 1. Cline, J., Braman, J.C., and Hogrefe, H.H. (1996), Nucleic Acids Res. 24: 3546-3551.
  • 2. Lundberg, K.S., et al. (1991), Gene. 108: 1-6.
  • 3. Scott, B., Nielson, K., Cline, J., and Kretz, K. (1994), Strategies. 7: 62-63.
  • 4. Bergseid, M., et al.  (1991), Strategies. 7: 62-63.
  • 5. Cline, J., et al. (1992), Strategies. 5: 50.
  • 6. Flaman, J.-M., et al. (1994), Nucleic Acids Res. 22: 3259-3260.

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>>  Licensing

U.S. Patent Nos. 6,734,293, 6,444,428, 6,183,997, 5,948,663, 5,545,552

Native Pfu:

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U.S. Patent Nos. 7,045,328; 6,489,150; 5,948,663; 5,866,395; and 5,545,552 and patents pending
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Pfu DNA Polymerase (native), 1000 U 600140 1,000 U お問い合わせください Call
Native version. The highest fidelity enzyme for PCR and primer-extension reactions, PCR cloning and generating blunt-end amplification product.
Native Pfu DNA polymerase, 10X Native Plus buffer
分析保証書 (C of A) 分析保証書 (C of A)  マニュアル マニュアル
Cloned Pfu DNA Polymerase, 100 U 600153 100 U お問い合わせください Call
Recombinant version, For high-fidelity PCR and primer-extension reactions, For PCR cloning and generating blunt-end amplification product.
Cloned Pfu DNA polymerase, 10X Cloned Pfu buffer
分析保証書 (C of A) 分析保証書 (C of A)  マニュアル マニュアル
Cloned Pfu DNA Polymerase, 500 U 600154 500 U お問い合わせください Call
Recombinant version, For high-fidelity PCR and primer-extension reactions, For PCR cloning and generating blunt-end amplification product
Cloned Pfu DNA polymerase, 10X Cloned Pfu buffer
分析保証書 (C of A) 分析保証書 (C of A)  マニュアル マニュアル
Cloned Pfu DNA Polymerase AD, 500 U 600355 500 U お問い合わせください Call
Recombinant version containing a reformulated buffer system for increased economy with the same performance and fidelity as our original Cloned Pfu DNA Polymerase, for high-fidelity PCR and primer-extension reactions, PCR cloning, and generating blunt-end amplification product
Cloned Pfu DNA polymerase AD, 10X Cloned Pfu AD buffer
分析保証書 (C of A) 分析保証書 (C of A)  マニュアル マニュアル
Cloned Pfu DNA Polymerase, 1000 U 600159 1,000 U お問い合わせください Call
Recombinant version, For high-fidelity PCR and primer-extension reactions, For PCR cloning and generating blunt-end amplification product
Cloned Pfu DNA polymerase, 10X Cloned Pfu buffer
分析保証書 (C of A) 分析保証書 (C of A)  マニュアル マニュアル
Cloned Pfu DNA Polymerase AD, 1,000 U 600357 1,000 U お問い合わせください Call
Recombinant version containing a reformulated buffer system for increased economy with the same performance and fidelity as our original Cloned Pfu DNA Polymerase, for high-fidelity PCR and primer-extension reactions, PCR cloning, and generating blunt-end amplification product
Cloned Pfu DNA polymerase AD, 10X Cloned Pfu AD buffer
分析保証書 (C of A) 分析保証書 (C of A)  マニュアル マニュアル
Cloned Pfu DNA Polymerase, 5000 U 600160 5,000 U お問い合わせください Call
Recombinant version, For high-fidelity PCR and primer-extension reactions, For PCR cloning and generating blunt-end amplification product
Cloned Pfu DNA polymerase, 10X Cloned Pfu buffer
分析保証書 (C of A) 分析保証書 (C of A)  マニュアル マニュアル